質(zhì)粒中提試劑盒QIAGEN Plasmid Midi Kit
純化至多100 μg轉(zhuǎn)染級質(zhì)?；蚩滤官|(zhì)粒DNA
1．純化得到相當于2次CsCl梯度離心得到的DNA純度
2．高產(chǎn)量質(zhì)粒DNA
3．經(jīng)濟的制備方法
4．使用LyseBlue，獲得最佳的裂解效果和最大的DNA產(chǎn)量
QIAGEN Plasmid Kits通過重力流陰離子交換柱純化轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒DNA。該試劑盒可純化獲得至多100 μg質(zhì)粒DNA。離心獲得澄清的裂解產(chǎn)物和異丙醇沉淀。
詳細信息：
性能
QIAGEN Plasmid Midi Kits利用重力流QIAGEN-tip 100陰離子交換柱高效純化質(zhì)粒DNA。只需25–100 ml培養(yǎng)基，即可純化獲得多達100 μg的高拷貝質(zhì)粒DNA。（培養(yǎng)容量取決于質(zhì)粒拷貝數(shù)、插入片段大小、宿主菌株和培養(yǎng)基。）QIAGEN Plasmid Kits純化的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用，如：轉(zhuǎn)染、克隆、測序和體外轉(zhuǎn)錄。
原理
QIAGEN-tips內(nèi)獨特的陰離子交換樹脂專為純化核酸設(shè)計。它獨特的分離特性，使純化的DNA的純度相當于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度。預(yù)裝的QIAGEN-tips利用重力流原理工作，縮短了純化質(zhì)粒的手動操作時間。整套QIAGEN質(zhì)粒純化體系避免使用苯酚、氯仿、溴化乙錠和CsCl等有毒物質(zhì)，減小對使用者和環(huán)境的危害。
操作流程
使用QIAGEN Plasmid Kits，細菌裂解物通過離心澄清。澄清后的裂解物上樣到陰離子交換柱，質(zhì)粒DNA在適當?shù)牡望}條件和pH條件下與樹脂進行選擇性結(jié)合。RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和和其它低分子量雜質(zhì)用中鹽洗滌液去除，用高鹽緩沖液洗脫純質(zhì)粒DNA。純化得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后，通過離心收集。
應(yīng)用
QIAGEN Plasmid Kits純化得到的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用，如：
1．轉(zhuǎn)染
2．克隆
3．PCR
4．體外轉(zhuǎn)錄
技術(shù)參數(shù)：
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特點 |
參數(shù) |
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Applications |
Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc. |
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Culture volume/starting material |
25–100 ml culture volume |
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Plasmid type |
High-copy, low-copy, cosmid DNA |
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Processing |
Manual (centrifugation) |
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Samples per run; throughput |
1 sample per run |
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Technology |
Anion-exchange technology |
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Time per run or prep per run |
150 min |
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Yield |
<100 μg |
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